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为什么基础培养基和添加物在原代细胞培养中如此重要?

时间:2017-02-09 11:46 点击:2183次

选择怎样的培养基培养细胞是一件令人纠结的工作。选择已发表文章中用的培养基?补充添加物或额外营养来优化培养基?还是购买商业化的配套培养基?最重要的是,要了解不同的培养基会影响你的原代细胞培养及后续研究。

许多研究人员通常使用经典培养基培养细胞系,这类培养基足够用于细胞系的培养。但原代细胞往往需要额外的营养才能有良好的性状。细胞系和原代细胞之间存在差异,这些差异影响细胞对营养的需求。比如:细胞系增殖能力很强,很好地适合于2维培养,对培养条件的要求宽松与此相反,原代细胞分离自3维生长的宿主组织,然后转移到2维环境中培养,所以有着更为复杂的营养需求。此外,原代细胞比细胞系的增值能力弱,随着培养时间的推移,原代细胞会越来越衰老,而且原代细胞寿命也短。由于这些差异,特殊培养基往往是原代细胞培养的一个更好的选择。

特殊培养基为每种特定的细胞类型进行了优化,通常比传统培养基更复杂。特殊培养基通常被设计为低浓度血清或者无血清,因此培养基需要额外补充生长因子、脂肪和激素。这种通过添加特定的组分,可以使培养基的组分和浓度得到优化,从而用于培养特定类型的细胞。 

为了要说明不同的基础培养基和添加物对您的原代细胞培养产生影响,我们做了一个简单的实验。我们以不易培养的人真皮微血管内皮细胞原代细胞为例。分别在适于人真皮微血管内皮细胞培养的DMEM/F12基础培养基中和Sciencell优化的特殊培养基(ECM;Cat# 1001)进行细胞培养并比较。此外,我们观察和比较了高浓度血清(FBS 10%)与低浓度血清(FBS 5%)+内皮细胞生长添加物(ECGS;Cat# 1052,含有混合激素和生长因子)对内皮细胞培养的影响。

虽然最开始的细胞接种密度相同,但细胞在不同培养基中的生长状况非常不同。我们观察到:1.在DMEM / F12培养细胞的过程中,添加5%FBS和ECGS的组合比与10%FBS生长更快。我们还观察到细胞在这些条件下与内皮细胞培养基生长有相似的趋势。这表明低浓度血清+生长因子和激素组合对内皮细胞增殖更有利。2.比较不同基础培养基都添加5%FBS和ECGS后对细胞生长的影响。结果与DMEM / F12相比,ECM培养细胞不仅生长更快,而且具有更紧凑的形态。 

这些研究结果并不限于微血管内皮细胞。我们使用大血管内皮细胞进行了相同的实验,获得了类似的结果。总之,这些图显示了优化后的专用培养基+补充剂对原代细胞生长具有更为有利和显著的影响。请记住,您培养的原代细胞越健康,您的结果才越接近真实的状况。

    总之,考虑原代细胞与细胞系直接存在明显区别,原代细胞的生长需要更为复杂,所以选择最适合培养基去培养才能保证细胞的良好状态。在ScienCell公司,我们投入了大量的时间和资源,为每种原代细胞类型寻找最佳的培养基。我们的原代细胞专用培养基套,包括基础培养基,生长添加物,青霉素/链霉素和FBS(如果需要)优化结合使用,能够保证原代细胞培养的良好状态。

裕恒丰(美国Sciencell一级代理)订购热线:010-63804220、63803739、63861816、63822556

 
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